مطالعه ژنوتیپی نئوسپورا کانینوم دراواوسیست دفعی از سگ و کیست های مغزی گنجشک با استفاده از ژن nc5و ناحیه its1

نئوسپورا کانینوم تک یاخته ای انگلی، که در سال 1984 در سگ شناسایی شد، در سال 1989 به عنوان عامل سقط جنین گاوی معرفی گردید. امروزه نئوسپورا کانینوم به عنوان یک عفونت جهانی در سگ و گاو مطرح می باشد. خسارات اقتصادی زیادی به صنعت گاوداری های شیری و گوشتی وارد می کند. آلودگی به این انگل در حیوانات مختلف با روش های سرولوژی، آسیب شناسی، هیستوشیمی، ایمنوهیستوشیمی و مولکولی قابل شناسایی می باشد به علت شباهت مرفولوژیکی اواوسیست ،تاکی زوئیت، برادی زوئیت، نئوسپورا کانینوم با سایر اپی کمپلکس ها ( توکسوپلاسما، هاموندیا، سارکوسیستیس) بررسی مولکولی برای تعیین نئوسپورا و گونه های آن لازم و ضروری می باشد بنابر این در این مطالعه از روش مولکولی، برای تشخیص و تعیین ژنوتایپ انگل در اواوسیست دفعی در مدفوع سگ و کیست نسجی ناشی از نئوسپورا کانینوم در مغز گنجشک به کار رفته است. در این مطالعه بررسی شیوع سرمی پادتن علیه انگل در گاوهای شیری نیز مدنظر بوده است. در این مطالعه 181 نمونه سرم از گاوهای شیری آزمایش شد که شیوع پادتنی انگل (6/27?) بوده است. از نظر آماری بین گروه های سنی اختلاف معنی داری مشاهده نشد، ولی خطر سقط در گاوان سرم مثبت نسبت به گاوان سرم منفی از نظر آماری معنی داری بود است. در این مطالعه برای شناسایی انگل در اواوسیست دفعی از سگ و بررسی آن ها با استخراج dna به روش ctab ، واکنش زنجیره ای پلی مراز انجام گرفت که از 428 نمونه مدفوع به روش مولکولی، در 9 نمونه ، ژن nc5 تکثیر یافت. پس از تعیین توالی، طول قطعه تکثیر یافته حدودbp 340 بود که با موارد ثبت شده در بانک جهانی مشابهت داشت. در نمونه های مدفوعی ناحیه its1 به روش nested-pcr تکثیر یافت، پس از تعیین توالی طول قطعه تکثیر یافته حدودbp 249 بود که با موارد ثبت شده در بانک جهانی مشابهت داشت. هم چنین در این مطالعه برای بررسی نقش گنجشک در چرخه زندگی انگل، dna نمونه های مغز گنجشک به روش کیت استخراج شد، سپس واکنش زنجیره ای پلی مراز انجام گرفت که از 212 نمونه مغز، به روش مولکولی، ژن nc5 در 11 نمونه تکثیر یافت. پس از تعیین توالی، طول قطعه تکثیر یافته، حدودbp 340 بود که با موارد ثبت شده در بانک جهانی 100-95? مشابهت داشتند در نمونه های مغزی هم ناحیه its1 به روش nested-pcr تکثیر یافت. پس از تعیین توالی، طول قطعه تکثیر یافته حدودbp 249 بود که با موارد ثبت شده در بانک جهانی شبیه بودند.. توالی ناحیه its1 نمونه ها مغزی و مدفوعی با هم مشابه بودند. در کلیه موارد آنالیز فیلوژنتیکی صورت گرفت.